中国中铁为第一、二标段总承包单位，中国铁建为第三标段总承包单位。第一工区：共计1线1站1区间，包含陈官营停车场出入线、起点至陈官营区间、陈官营站，土建施工单位为中铁十一局、甘肃七建、中国八冶建设，施工监理为上海天佑工程咨询有限公司；第二工区：共计1站2区间，包含陈官营至奥体中心区间、奥体中心站、奥体中心至世纪大道区间（下穿黄河），土建施工单位为中铁十四局，施工监理为上海天佑工程咨询有限公司；第三、四工区：为试验段，共计2站1区间，包含世纪大道站、世纪大道至迎门滩区间、迎门滩站，已于2012年7月开工建设，土建施工单位为中铁二十一局，施工监理为铁科（北京）工程咨询有限公司；第五工区：共计1站2区间，包含迎门滩至马滩区间（下穿黄河）、马滩站、马滩至土门墩区间，土建施工单位为中铁十六局，施工监理单位为上海三维工程建设咨询有限公司；第六工区：共计2站2区间，包含土门墩站、土门墩至西客站区间、西客站至西站什字区间、西站什字站，土建施工单位为中铁十七局，施工监理单位为甘肃铁科建设工程咨询有限公司；第七工区：包括西客站（含2号线该站及换乘），土建施工单位为中铁二十一局，施工监理单位为甘肃铁科建设工程咨询有限公司；第八工区：共计2站2区间，包含西站什字至七里河区间、七里河站、七里河至小西湖区间、小西湖至文化宫区间，土建施工单位为中铁十三局、中铁十八局、甘肃七建、中国八冶建设，施工监理单位为中铁济南工程建设监理有限公司；第九工区：共计2站1区间，包含小西湖站、文化宫站、文化宫至西关什字区间，土建施工单位为中交隧道工程局，施工监理单位为中铁济南工程建设监理有限公司；第十工区:共计2站2区间，包含西关什字站、西关什字至省政府区间、省政府站、省政府至东方红广场区间，土建施工单位为中铁21局，施工监理单位为甘肃铁一院工程监理有限责任公司；第十一工区：包括东方红广场站（含2号线该站及换乘），土建施工单位为中铁二十局，施工监理单位为甘肃铁一院工程监理有限责任公司；第十二工区：共计1站2区间，包含东方红广场至盘旋路区间、盘旋路站、盘旋路至五里铺区间，土建施工单位为中铁一局、兰州市政集团，施工监理单位为广东铁路建设监理有限公司；第十三工区：包括五里铺站（含2号线该站及换乘），土建施工单位为中铁港航局，施工监理单位为甘肃信达建设工程咨询有限公司；第十四工区：共计2站2区间，包含五里铺至东部市场区间、东部市场站、东部市场至拱星墩区间、拱星墩站，土建施工单位为中铁二局，施工监理单位为广东铁路建设监理有限公司；第十五工区：共计1线1站1区间，包含拱星墩至焦家湾区间、焦家湾站、东岗车辆段出入线，土建施工单位为中铁隧道局，施工监理单位为甘肃信达建设工程咨询有限公司；第十六工区：共计1线1站1区间，包含焦家湾至东岗区间、东岗站、东岗站站后配线段，土建施工单位为中铁航空港，施工监理单位为甘肃信达建设工程咨询有限公司。